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人原代髓核原代細胞

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：人

組織來源：脊髓脊髓

生長特性：貼壁生長

產品規格：5x105cells/T25細胞培養瓶
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%胰蛋bai酶

產品貨期：7-8周左右

運輸方式：T25培養瓶/ 順豐快遞（包郵）

供應限制：僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

背景介紹：:髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結構的一部分，位于兩軟骨板與纖維環之間。由縱橫交錯的纖維網狀結構即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質構成的彈性膠凍物質。

發育成熟的髓核是一個由軟骨樣細胞分散在細胞間質內，周圍圍繞著一個比較致密的膠原纖維網的含水球，位于椎間盤偏后位置，占推間盤橫斷面積的50%～60%；由于它的含水量很高，并和軟骨終板緊密接觸，是椎間盤接受經軟骨終板主要營養途徑滲透交換營養的主要部分。

下腰痛是臨床常見病，其病因主要是椎間盤退變所致。椎間盤退變的主要機制首先是椎間盤內髓核細胞逐漸衰老、凋亡，并導致細胞外基質的化學成分和結構改變。

細胞培養操作：

收貨處理取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養

傳代代數可傳5代左右；3代以內狀態

傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法：

1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4.待細胞貼壁后，培養觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。

原代細胞培養的主要步驟包括：

?一、剝離組織，去除外膜、結締組織等?：將組織從動物體中取出，并去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當的緩沖液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。

三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進行消化。消化時間可根據具體實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

?四、吹打分散后，過濾、計數?：將消化后的細胞吹打到一個離心管中，然后過濾、計數。

五、?按30萬/毫升分瓶培養?：將計數后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養。

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